Il 6 gennaio 1935 l'Associazione fu accolta sotto la sua protezione dal Vescovo di Vitoria, Dr. Mateo Múgica che eresse l'Associazione a Congregazione di diritto diocesano. Da questo momento la nuova fondazione di Madre Speranza si chiamerà: Congregazione delle Ancelle dell'A.M.

Nel maggio del 1936, Madre Speranza, insieme alla Sig.na Pilar de Arratia, insigne benefattrice della Congregazione, venne a Roma dove prese in affitto una casa in una delle zone più povere, via Casilina 222, di proprietà delle Suore di Namur.

Gli anni che seguirono furono tra i più sofferti. L'aperta opposizione nei confronti della nuova fondazione scatenata dai Vescovi e Sacerdoti di Spagna non si era mai fermata. In questi anni, dal 1936 al 1941, detta opposizione incontrò un terreno propizio e favorevole per scatenare una forte lotta all'interno stesso dell'Istituto, fra alcuni membri di esso. Questi arrivarono a desiderare e provocare la rimozione di Madre Speranza dal Governo della Congregazione, ritenendola intransigente ed eccessivamente dura nel modo di impostare per sé e per gli altri la vita religiosa. Fu accusata di aver mancato a tutti e dieci i comandamenti, furono inventati fatti e diffusi scritti infamanti. Madre Speranza si vide ancora una volta sola con la netta percezione che questa volta si stava tentando di distruggere quello che lei aveva di più caro e per cui aveva speso la vita: la sua "amata Congregazione". Le accuse, inviate alle Autorità ecclesiastiche, furono tali da obbligare il Nunzio apostolico ed il Santo Officio a dover intervenire.

Il 6, 7 e 8 agosto del 1940 Madre Speranza fu chiamata una prima volta dal Santo Officio a rispondere sulle accuse rivoltele, sulla ortodossia della dottrina dell'A.M., sulla sua condotta e sulla veridicità e natura di particolari fenomeni attribuiti alla sua persona. In data 10 aprile 1941 il Santo Officio accolse la Congregazione sotto la sua protezione affidandone la direzione al Vescovo di Tarazona; pur lasciando a Madre Speranza il titolo di Superiora generale e la possibilità di formare le suore, affidò alla Vicaria generale il governo della Congregazione. Madre Speranza accolse il provvedimento con spirito di sottomissione e di obbedienza e a questo esortò anche le sue figlie.